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서론
육계의 조단백질 소화율 측정 시, 요산에서의 질소함량 차이가 조단백질 소화율에 영향을 미칠 수 있기 때문에 총 배설물보다 회장에서 소화물을 채취하는 소화율을 측정하는 방법을 많이 사용하고 있다. 많은 연구들에서 육계의 조단백질과 아미노산의 회장 소화율을 외관상 회장 소화율(Apparent Ileal Digestibility; AID)로 제시하고 있다. 하지만, Stein et al. (2007)은 아미노산 및 단백질의 외관상 회장 소화율은 배합사료에서의 단백질의 함량이 낮은 원료사료를 사용시에 가산성이 부족하다고 하였고, 또한 Kong and Adeola(2013)는 아미노산의 표준 회장 소화율(Standardized Ileal Digestibilityl; SID)이 배합사료에서 가산성을 만족하며 더 적절한 소화율이라고 제시하였다. 배합사료내에서 가산성을 만족한다면, 배합사료내의 조단백질 함량은 각각의 원료사료내 조단백질 함량의 합과 같다(Stein et al., 2005). 조단백질의 함량이 낮은 원료사료의 회장 소화율 측정 시 소화물 내의 기초 내생 단백질 손실이 차지하는 비율이 크기 때문에 외관상 회장 소화율은 저평가되는 경향이 있다(Kong and Adeola, 2013).
원료사료 내 영양소 소화율은 측정하고자 하는 원료사료를 사료내 유일한 측정 영양소 공급원으로 하는 직접법과 일반사료를 기초사료로 하고 그 기초사료에서 측정하고자 하는 원료사료를 일정량 대치하여 측정하는 간접법 등으로 측정이 가능하다(Kong and Adeola, 2014). 또한, Fan and Sauer (1995)는 돼지에서 직접법으로 구한 단백질 함량이 낮은 원료사료의 외관상 단백질 회장 소화율은 저평가되는 경향이 있어 사료배합 시 가산성을 만족하지 못하므로 소화율을 회귀분석법이나 간접법을 사용하여 측정해야 한다고 제시하였다. 그러나, 육계 사료에서 각각의 방법으로 구한 조단백질 소화율 간의 비교 연구가 부족한 실정이다. 따라서, 이 연구의 목적은 옥수수와 대두박의 외관상 및 표준회장 단백질 소화율을 직접법과 간접법으로 구한 값의 비교와 배합사료내 가산성을 평가하는 것이다.
재료 및 방법
평균 체중이 38.5 g인 총 525마리의 육계 수컷(Ross 308)을 공시하여 1일령에 개별 인식표를 부착하고 시판 육계전기사료를 18일간 급여하였으며, 실험사료는 이후 23일령까지 5일간 급여하였다. 전기사료는 에너지와 영양소 요구량을 충족하거나 초과하는 수준으로 배합되었다(NRC, 1994). 18일령의 육계를 무질소 사료를 제외한 5개의 처리구에 케이지 당 12수씩 총 7반복으로 난괴법(randomized complete block design)을 이용하여 배치하였으며, 무질소 사료는 케이지당 15수씩 7반복으로 구배치를 하였다(Kim and Lindemann, 2007). 실험사료는 조단백질 함량이 각각 9.17%인 옥수수와 46.17 %인 대두박을 기반으로 구성하였고, 기초사료(사료3)는 NRC (1994)에서 권장되는 영양소 요구량 중 아미노산을 제외하고 모두 만족하도록 배합하였다(Table 1). 사료1과 사료5는 옥수수 혹은 대두박만을 각각 단백질 공급원의 유일한 원료가 되도록 배합되었으며, 사료2와 사료4는 각각 사료1과 사료5에서 일정한 함량의 기초사료(사료3)를 차이법(difference method)을 이용하여 옥수수와 대두박으로 같은 비율로 대체하도록 만들었다. 따라서, 기초사료(사료3)에서부터 사료2와 사료1은 일정한 함량으로 옥수수가 증가하고, 사료4와 사료5는 일정한 함량으로 대두박이 증가하도록 하였다. 무질소사료는 기초 내생 단백질 손실을 측정하기 위한 배합사료이며, 모든 실험사료는 0.5%의 산화크롬을 소화율 계산을 위한 지시제로 첨가하였다. 전체 실험기간 동안 육계에게 물과 사료를 무제한 급이하였으며, 점등은 전체 실험기간 동안 24시간 종일 점등을 실시하였다. 시험에 관련된 닭의 관리 및 취급은 건국대학교의 동물실험윤리위원회(IACUC)의 규정을 준수하여 시행하였다.
3 Provided the following quantities per kilogram of premix: vitamin A, 1,600,000 IU; vitamin E, 800 IU; vitamin K3, 132 mg; vitamin B1, 97 mg; vitamin B2, 500 mg; vitamin B6, 200 mg; vitamin B12, 1,200 mg; nicotinic acid, 2,000 mg; calcium pantothenate, 800 mg; folic acid, 60 mg; choline chloride, 35,000 mg; zinc, 9,000 mg as zinc sulfate; manganese, 12,000 mg as manganese sulfate; iron, 94,000 mg as iron sulfate; copper, 500 mg as copper sulfate; iodine, 250 mg as calcium iodide; cobalt, 100 mg as cobalt sulfate; selenium, 50 mg as sodium selenite.
23일령에 모든 육계를 이산화탄소로 안락사 시킨 후, 회장 소화물을 메켈게실부터 회장과 맹장의 연결부위보다 2 cm 정도 위쪽까지, 즉 회장의 후반부 2/3를 증류수로 씻어내어 채취하였다(Kong and Adeola, 2013). 채취한 회장 소화물은 케이지 별로 취합하여 이후의 분석을 위해 —20℃의 냉동고 저장하였다.
옥수수와 대두박만을 각각 단백질 공급원으로 하는 사료1과 사료5로부터 직접법으로 옥수수와 대두박 각각의 원료사료 소화율을 구하였고, 측정 외관상 및 표준 회장 소화율과 기초 내생 조단백질은 다음 공식으로 계산되었다(Kong and Adeola, 2014).
외관상 회장 소화율(AID, %) =100 — [(Cri/Cro × CPo/CPi) × 100]
기초 내생 조단백질(BEL, mg/kg of DM intake) =(Cri/Cro) × CPo× 10,000
표준 회장 소화율(SID, %) = AID + (BEL/CPi × 10,000) × 100
Cri과 Cro은 각각 배합사료와 회장 소화물 내의 크롬의 농도(%)이고, CPi와 CPo는 각각 배합사료와 회장 소화물 내의 조단백질 농도(%)이다.
각 원료사료의 조단백질 함량과 직접법으로 측정된 소화율을 이용하여 ‘기초 + 옥수수’(사료2), ‘기초사료’(사료3) 및 ‘기초 + 대두박’(사료4)의 ‘예측 소화율’(predicted digestibility) 값을 계산하였고 ‘예측 소화율’은 실제로 육계에게 사료를 급여하여 구한 ‘측정 소화율’(measured digestibility)과 비교하여 두 값의 차이가 없는 경우 가산성이 있는 것으로 판단하였다(Kong and Adeola, 2014).
예측 외관상 및 표준 회장 조단백질 소화율은 다음의 공식을 이용하여 계산하였다;
예측 외관상 회장 조단백질 소화율(AIDp, %) =
[(AIDCorn × CPCorn) + (AIDSBM × CPSBM)]/(CPCorn + CPSBM)
예측 표준 회장 조단백질 소화율(SIDp, %) =
[(SIDCorn × CPCorn) + (SIDSBM × CPSBM)]/(CPCorn + CPSBM)
AIDCorn와 AIDSBM는 각각 옥수수와 대두박의 외관상 회장 조단백질 소화율이고, SIDCorn와 SIDSBM은 각각 옥수수와 대두박의 표준 회장 소화율(%)이며, CPcorn와 CPSBM은 각각 배합사료내 옥수수와 대두박의 조단백질의 농도(%)이다.
Kong and Adeola(2014)의 차이법을 이용하여 옥수수와 대두박의 간접법 소화율을 계산하였고, 직접법과 간접법을 이용하여 구한 각각의 조단백질 소화율을 비교하였다.
실험 데이터의 통계분석은 SAS(SAS Inst. Inc., Cary, NC)의 T-TEST 방법을 이용하여 분석하였고, 유의수준은 0.05로 설정하였다. 측정 소화율을 예측 소화율에서 뺀 차이로 측정 소화율과 예측 소화율 값을 단일표본 양측 t검정 방법을 이용하여 비교하였고, 실험단위는 케이지였다.
결과 및 고찰
‘옥수수’(사료1), ‘기초 + 옥수수’(사료2), ‘기초사료’(사료3), ‘기초 + 대두박’(사료4), ‘대두박’(사료5) 및 무질소사료에서의 조단백질 함량은 각각 8.77, 13.8, 19.1, 20.7, 20.7 및 0.33 %로 나타났다(Table 1). 무질소 사료를 이용하여 측정한 기초 내생 단백질 손실 값은 건물 섭취 1 kg당 8,343 mg이었다.
옥수수의 외관상 및 표준 회장 조단백질 소화율은 각각 76.2와 85.0%였고, 대두박의 외관상 및 표준 회장 조단백질 소화율은 83.5와 87.2%로 측정되었으며(Table 2) 이 값은 이전의 연구에서 측정한 값과 유사한 수치였다(Huang et al., 2006; de Coca-Sinova et al., 2008; Kong and Adeola, 2013). 하지만, 본 실험에서의 기초 내생 단백질 손실이 건물 1 kg 섭취당 8,343 mg으로 다른 연구보다 낮은 수준이었기 때문에(Kong and Adeola, 2013; Adedokun et al., 2014), 옥수수와 대두박의 표준 회장 조단백질 소화율은 이전의 연구 결과보다 낮게 나타났다(Adedokun et al., 2014).
| Direct | Indirect | Standard error | P-value | ||
|---|---|---|---|---|---|
| Corn | AID | 76.2 | 77.2 | 2.44 | 0.72 |
| SID | 85.0 | 86.1 | 2.44 | 0.66 | |
| Soybean meal | AID | 83.5 | 89.0 | 2.06 | 0.04 |
| SID | 87.2 | 92.4 | 2.06 | 0.05 | |
외관상 회장소화율과 표준 회장소화율 간의 차이는 대두박보다 옥수수에서 더 크게 나타났다. 이 결과는 대두박과 비교하였을 때 옥수수가 상대적으로 더 조단백질 함량이 낮은 원료이므로, 회장 소화물내 전체 조단백질 중 기초 내생 조단백질이 차지하는 비율이 대두박에 비해 옥수수에서 더 크게 나타났고, 따라서, 옥수수의 외관상 회장 조단백질 소화율이 저평가되었으며, 기초 내생 단백질로 소화율을 보정해 줄 때 옥수수의 표준 회장 조단백질 소화율은 대두박에 비해 더 많이 증가하였음을 알 수 있었다(Kong and Adeola, 2013).
옥수수와 대두박의 외관상 및 표준 회장 조단백질 소화율을 각각 직접법과 간접법으로 구한 값을 비교하였을 때, 옥수수의 경우 외관상 및 표준 회장 조단백질 소화율 모두 유의한 차이가 나타나지 않았으나, 대두박의 경우 간접법을 이용한 조단백질 소화율이 외관상 회장 소화율에서 직접법을 이용한 소화율보다 더 높았다(P=0.04). 이는 본 실험에서 대두박(사료5)의 평균 소화율에 비해 기초 + 대두박(사료4)의 평균 소화율이 높게 관측되었기 때문에, 기초(사료3)와 기초 + 대두박(사료4)을 이용하여 간접법으로 측정한 대두박의 단백질 소화율 값이 높아진 것으로 사료된다.
예측한 외관상 및 표준 회장소화율과 측정 소화율 값은 Table 3에 제시하였다. ‘예측 소화율’은 옥수수와 대두박의 소화율과 배합사료내 각각의 원료사료의 함량을 이용하여 계산하였는데, ‘기초 + 옥수수’(사료2)와 ‘기초사료’(사료3)의 외관상 및 표준 회장 예측 소화율이 측정 소화율 값보다 더 높게 나타났다. 그러나, ‘기초 + 대두박’(사료4)의 외관상 및 표준 회장 소화율 모두에서 예측 소화율과 측정 소화율 간의 통계적 유의차는 나타나지 않았다. 이것은 상대적으로 기초 내생 조단백질의 함량에 영향을 덜 받는 대두박이 사료내 조단백질에 기여하는 함량이 높아 직접법으로 측정한 옥수수와 대두박의 소화율을 이용하여 예측한 소화율 값이 실제 측정한 소화율값과 유의한 차이를 보이지 않은 것으로 사료된다.
이론적으로, 예측 외관상 소화율이 측정 외관상 소화율보다 그 값이 작아야 하지만, 본 실험에서는 사료2와 사료3에서 예측 소화율 값이 더 크게 계산되었다(Kong and Adeola, 2013). 이는 유사한 사료의 배합비로 측정한 실험에서의 외관상 소화율과 비교하였을 때 사료2와 사료3의 소화율이 낮게 측정되었기 때문일 것으로 사료된다. 옥수수와 대두박 배합사료(사료2∼4)에서 표준 회장 조단백질 소화율의 예측치와 측정치 값들 간에 유의한 차이가 없을 것으로 예상되었으나, ‘기초 + 옥수수’(사료2)와 ‘기초사료’(사료3)의 예측 및 측정 표준 회장 조단백질 소화율 간의 유의차가 나타나, 본 실험에서 측정한 옥수수와 대두박의 표준 회장 조단백질 소화율이 배합사료에서 가산성을 만족하지 않았는데, 이것은 본 실험에서 측정된 기초 내생 단백질의 양이 낮게 나타나 상대적으로 기초 내생 단백질이 소화물 내에 차지하는 비율이 낮아 그 영향이 작았기 때문이라고 사료된다(Kong and Adeola, 2013; Adedokun et al., 2014).
결론적으로, 옥수수와 대두박의 외관상 및 표준회장 조단백질 소화율을 직접법과 간접법으로 구한 값의 비교에서 옥수수는 직접법과 간접법 간의 차이가 나타나지 않았고, 대두박은 간접법으로 측정한 값이 높았으며, 또한 직접법으로 구한 소화율을 기초로 하여 예측한 ‘기초사료’(사료3)의 소화율 값은 측정값과 서로 달라 가산성을 만족하지 않았다.
